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La cromatografía es un método instrumental fisicoquímico de separación de especies químicas, en los que estas se distribuyen entre dos fases no miscibles. Una de las fases es fija o estacionaria y tiene una gran área superficial, mientras que la otra, se mueve o percola sobre la estacionaria transportando las especies a separar. Este método fue empleado por primera vez por Tswett en 1903 para separar diversos pigmentos vegetales, por paso de un extracto en éter de petróleo de hojas verdes a través de un tubo o columna de vidrio rellena de carbonato cálcico finamente pulverizado.
En documentoscopia hizo sus primeras apariciones, hacia 1950, cuando Somerford aplicó la cromatografía de papel para la identificación de tintas, años más tarde está técnica dejo paso y fue relegada por la cromatografía de capa fina o TLC, abreviatura de "Thin Layer Cromatography".
En todos los procedimientos cromatográficos se sigue la misma secuencia: 1) se aplica la muestra, 2) se separan los componentes a lo largo de una columna, película, placa... 3) se identifican las bandas o zonas separadas.
La separación cromatográfica se considera tanto mejor cuantas más bandas diferentes aparecen a lo largo del recorrido y cuanto más diferenciadas o separadas están las diferentes manchas entre sí. Técnicamente se diría que la separación es tanto mejor cuanta más diferencia presenten los valores de Rf*. y cuanto más estrechas sean las bandas obtenidas.
* El Rf es un valor que oscila entre 0 y 1, y que identifica una mancha. Es el cociente obtenido al dividir la distancia que hay desde la línea de siembra hasta la mancha entre la distancia recorrida por el eluyente desde la línea de siembra hasta que sacamos la placa de la cámara.
El protocolo o procedimiento que se sigue para realizar corrimientos de tintas en un laboratorio forense utilizando la técnica de cromatografía de capa fina (desde aquí la recomendamos frente a la de papel) poco instrumentalizado es el siguiente:
Se toman unas placas de sílica gel que se venden ya preparadas en el mercado, de formato 20x20 cm. y con un detector de U.V. de 254 nm. Se han toman pequeños fragmentos de trazado realizado con las tintas a analizar, se disuelven cada uno de ellos en el mismo solvente o mezcla de ellos que será utilizado con posterioridad para el corrimiento cromatográfico. Estas disoluciones se aplicaran con una micropipeta, un capilar..., a una distancia aproximada de 2 cm. del borde inferior de la cromatoplaca depositando pequeñas gotas y secando para evaporar el disolvente, creando así en la línea de siembra un conjunto de manchas circulares. Se recomienda con anterioridad calentar la misma antes del sembrado para activar la misma. Después se colocan las placas en una cámara de separación, que contiene el eluyente o mezcla apropiadas hasta una altura aproximada de unos 0,5 cm. Antes, se ha procurado que la atmósfera de la cámara esté saturada con el vapor del eluyente. Se deja evolucionar hasta que el frente del eluyente ha recorrido un trayecto suficiente (unos 10 cm. aproximadamente desde la línea de origen), entonces se ha procedido a sacar la placa de la cámara y a su secado y a su posterior interpretación.
En este desarrollo únicamente faltaría saber cual es el disolvente o mezcla de disolventes adecuados para el mejor corrimiento, y este sería un análisis y una decisión que habría que tomar con un análisis óptico de las tintas en cuestión, ahora bien, nuestras investigaciones hacen que consideremos que la mezcla Nakamura : etanol:metanol:agua destilada en proporción 50:10:15 da bastantes buenos resultados para casi todas las tintas de útil escritural que hay hoy en día en el mercado.
En lo que resulta a las aplicaciones de esta técnica en documentoscopia, es evidente que puede servirnos para determinar de una forma cualitativa si dos tintas tienen la misma composición.
En una consulta anterior ya se ha informado de: En lo que respecta a la cromatografía gaseosa se conoce en 1985 un estudio de Stewart en el que desarrolla el método de cromatografía gaseosa para determinar edad de tintas de bolígrafo en papel, midiendo un parámetro que muestra que cantidad relativa de los compuestos volátiles de la tinta cambia a medida que la tinta envejece en el papel. En 1990 Bezhanishvi modificó el método de Stewardt que contenían dos compuestos: fenolfxitanol y talocianina. Este método utiliza también la cromatografía gaseosa seguida por determinación espectrofotométrica.
Espero haber contestado a sus inquietudes y que nuestras indicaciones le sean de utilidad.
Cordialmente, |
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